BDP TR-Ceramide也被称为 高尔基体红色荧光探针,是一种神经鞘脂(sphingolipid)类的红色/橙色荧光染料,一般应用于染色活细胞中的高尔基体。神经酰胺的合成发生在内质网,高尔基体荧光探针可以通过神经酰胺转运蛋白(CERT)或囊泡转运输送到高尔基体,从而实现染料的特异性标记。荧光波长:在 589 nm 处具有峰值激发,在 616 nm 处具有峰值发射(Ex/Em=582/592nm)。
产品参数:
分⼦式: C46H65BF2N4O4
Ex/Em: 582/592 nm
分⼦量: 786.86
存储:-20°C,避光
化学结构式:
实验步骤:
BDP TR-Ceramide-BSA复合物的制备
对于活细胞的染色,可以使用BDP TR-Ceramide-BSA复合物。
BDP TR-Ceramide的BSA复合物制备流程如下:
1、向含有BDP TR-Ceramide的试管中加入318µL(氯仿∶乙醇的体积比=19∶1),制成1 mM存备液。
2、将50µL BDP TR-Ceramide储备液加入一个小玻璃试管中,先在氮气流下干燥,然后在真空下干燥1h,最后用200µL的无水乙醇重新溶解。
3、在50 mL离心管中加入10 mL(Hanks缓冲盐溶液+10 mM HEPES,pH 7.4的HBSS/HEPES),再加入3.4 mg(0.34 mg/mL)脱脂BSA。
4、将10mL 含有BSA的溶液的离心管放在涡流式混合器上震荡均与。并将200µL的BDP TR-Ceramide乙醇溶液加入离心管中。得到5µM BDP TR-Ceramide-BSA复合物置于-20°C存储。
BDP TR-Ceramide-BSA复合物标记活细胞中的高尔基体
1、在适当的培养基(如HBSS/HEPES)中冲洗载玻片上生长的细胞。
2、然后将细胞与HBSS/HEPES中的5µM BDP TR-Ceramide-BSA复合物置于4°C下孵育30min。
3、用冷的培养基冲洗数次,并加入新鲜培养基在37°C环境中再孵育30min。
4、用新鲜培养基中洗涤后,使用荧光显微镜观察。高尔基体标记显著,其他细胞内膜标记较弱。
案例分析:
抗体标记 | BDP TR-Ceramide标记 | Merge |
注意事项:1. 建议储存液在 -20℃ 或 -80℃ 避光保存,避免反复冻融。
2. 根据实际情况调整工作液浓度与孵育时间。
3. 或使用效果不佳,去除细胞培养液时,可用适量 Hanks 平衡盐溶液对细胞进行洗涤。
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。