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南京知凡生物技术有限公司

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免疫共沉淀CO-IP

免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)技术是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的,用于研究蛋白质相互作用的基本方法。主要用于纯化目的蛋白、定性检测抗原或抗体的目的。

实验原理:

以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成。加入能够与靶蛋白抗体结合的protein A/G,形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体”复合物。

技术原理图

应用领域:

1、测定两种目标蛋白质是否在体内结合;

2、确定一种特定蛋白质的新的作用搭档;

3、分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。

技术种类:
•  标签蛋白的免疫共沉淀 (Myc-tag, Flag-tag, HA-tag)
•  非标签蛋白的免疫共沉淀 (Native protein)
•  染色质免疫共沉淀(Chip-IP)
技术流程:
•  构建相关真核表达载体,转染细胞并获得表达;
•  蛋白质抽提与定量;
•  免疫沉淀(以normal IgG作为对照);
•  免疫沉淀产物SDS-PAGE和western blot分析;
•  完整技术服务实验报告提交。

实验流程

客户提供:

1、所研究的细胞株、新鲜组织样本、蛋白质溶液等样品

2、基因信息、物种信息及ID

3、IP级抗体及其说明书

服务内容:

1、PAGE电泳电子图片

2、鉴定结果:western blot X光片或质谱鉴定结果

3、数据处理及分析

4、完整的实验报告(实验仪器设备、试剂、实验方法、数据分析结果)

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