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南京知凡生物技术有限公司

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慢病毒包装

一、技术简介

慢病毒包装是慢病毒(Lentivirus)载体的构建过程重要的一环。慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)来源的一种病毒载体,慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装成为有感染力的病毒颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在细胞或活体组织中表达。

二、实验流程

1. 构建含有外源基因的重组载体。

2. 提取和纯化高质量的不含内毒素的重组质粒。

3. 共转染293T细胞,进行病毒包装和生产,收集、浓缩、纯化病毒液。

三、服务说明及结果

1. 客户提供:提供基因名称,插入片段序列、NCBI登录号等信息。

2. 公司提供:病毒液(≥1×109TU/mL),提供实验过程中所用的耗材、仪器设备和操作过程的说明清单一份。

3. 实验周期:30-40个工作日。

四、实验案例

Q-PCR测定滴度,纯化浓缩后的慢病毒滴度达到2.5x10E10 GC/ml,几乎比未纯化病毒多三个数量级。感染HEK293细胞48h后,计算被慢病毒感染阳性GFP细胞,GFP感染的单位 在4.6x10E9IU/ml,而未纯化浓缩的慢病毒只有2.3x10E6 IU/ml。


相同体积未纯化和纯化浓缩后慢病毒感染HEK293细胞(2ml细胞培养皿加入1ul病毒颗粒),48h后荧光显微镜拍照,纯化浓缩后的慢病毒显著地增强GFP表达和阳性GFP细胞数。


五、价格

1)过表达慢病毒服务:

慢病毒载体的构建(≤1.5kb)+ 1ml 慢病毒(滴度≥1×10^8 TU/ml):5,800元。

2)RNAi慢病毒全套服务:

RNAi载体构建(3条序列,保证1条有效)+ 1ml 慢病毒(滴度≥1×10^8 TU/ml):10,800元。

3)miRNA过表达慢病毒服务:

miRNA过表达载体构建+ 1ml 慢病毒(滴度≥1×10^8 TU/ml):5,400元。

备注:以上都免费赠送 0.2ml 对照慢病毒(滴度≥1×10^8 TU/ml)

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